NIBSC 06/206 人HPV18型標(biāo)準(zhǔn)品用于核酸檢測(cè)的第一個(gè) HPV 18 型 (HPV18) DNA 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)由冷凍干燥的重組質(zhì)粒 pBR322 含有通過(guò)其特別的 EcoR1 位點(diǎn)克隆的全長(zhǎng) HPV18 DNA (Quint et al., 2006)。 EcoR1 克隆位點(diǎn)位于 E1 基因內(nèi)。該標(biāo)準(zhǔn)已在純化的人類基因組 DNA 的背景下配制，以 0.5 ml 等分試樣凍干并在 -20 °C 下儲(chǔ)存。

單位：

HPV18 DNA 的第一個(gè)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)（NIBSC 代碼 06/206）已被規(guī)定為每安瓿 5 x 10^6 國(guó)際單位 (IU) 的單位。

可追溯性聲明：

它是在 2008 年 1 月的 WHO 會(huì)議上提出的（Ferguson 等人，

2009) HPV18 DNA 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的使用說(shuō)明包括用于確定用于制定國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的散裝材料的理論 HPV18 基因組當(dāng)量 (GEq) 的計(jì)算和假設(shè)，從而證明 1 IU 相當(dāng)于 1 HPV18 DNA 的 GEq。因此，第一個(gè) WHO HPV18 DNA 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的最終統(tǒng)一仍然是 IU，而可追溯性聲明將允許用戶將 IU 等同于 GEq。

材料的使用：NIBSC 06/206 人HPV18型標(biāo)準(zhǔn)品在重新配制之前，不應(yīng)嘗試稱量?jī)龈刹牧系娜魏尾糠帧?/span>

HPV18 DNA 的第一個(gè)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)包含高拷貝數(shù)模板。 HPV18質(zhì)粒的風(fēng)險(xiǎn)很高，打開(kāi)玻璃安瓿時(shí)通過(guò)霧化造成 DNA 污染。材料必須在單獨(dú)的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中打開(kāi)和處理，遠(yuǎn)離試劑、實(shí)驗(yàn)室器具和樣品等其他預(yù)放大組件。

NIBSC 06/206 人HPV18型標(biāo)準(zhǔn)品材料以凍干形式提供，使用前應(yīng)在 0.5 ml 無(wú)菌無(wú)核酸酶水中復(fù)溶。確保安瓿的內(nèi)表面被添加的水潤(rùn)濕，以便重組粘附在玻璃上的任何凍干材料顆粒。

重組材料的最終濃度為 1 X 10^7 IU/mL。重組材料適用于校準(zhǔn)內(nèi)部或工作標(biāo)準(zhǔn)，用于擴(kuò)增和檢測(cè) HPV18 DNA(WHO/IVB/10.12)。NIBSC 06/206 人HPV18型材料不應(yīng)用于校準(zhǔn)或評(píng)估提取、沉淀或離心程序。 NIBSC 可以為在提取步驟無(wú)法與擴(kuò)增步驟分離的分析中使用 06/206 提供指導(dǎo)（例如進(jìn)樣、應(yīng)答平臺(tái)）。該材料尚未針對(duì)人類 DNA 核酸擴(kuò)增技術(shù)進(jìn)行校準(zhǔn)。

配置：生物材料原產(chǎn)國(guó)：英國(guó)。每個(gè)安瓿含有 0.5 ml HPV18 質(zhì)粒 DNA 的凍干當(dāng)量，稀釋在 10 mM Tris 緩沖液 pH7.4 中，含有 1 mM EDTA、5 mg/ml 海藻糖和約 1 x 106 人 Geq/ml C33a 細(xì)胞。

存儲(chǔ)：收到時(shí)，NIBSC 06/206 安瓿瓶應(yīng)存放在 -20 °C 或以下。請(qǐng)注意：由于凍干材料固有的穩(wěn)定性，NIBSC 可能會(huì)在環(huán)境溫度下運(yùn)輸這些材料。